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長鞭紅景天懸浮培養(yǎng)細胞的玻璃化法超低溫保存研究
對長鞭紅景天懸浮培養(yǎng)細胞的玻璃化法超低溫保存進行了初步研究.結(jié)果表明,預培養(yǎng)、預處理、脫水處理及凍后處理對長鞭紅景天懸浮培養(yǎng)細胞存活率均有重要影響,方差分析結(jié)果均顯示差異顯著.長鞭紅景天懸浮培養(yǎng)細胞過程中最佳培養(yǎng)條件是:在含5%二甲基亞砜(DMSO)的MS培養(yǎng)基上預培養(yǎng)1 h,室溫下80%PVS2預處理40 min,然后用100%PVS2于0℃處理50 min,投入液氮(LN)保存1 h后在40℃水浴中迅速化凍,再用1.2 mol/L蔗糖培養(yǎng)液洗滌3次,每次10 min,洗滌后的懸浮培養(yǎng)細胞用氯化三苯四氮唑(TTC)法檢測,其存活率可達72.70%.
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